生物素连接酶BiotinProteinLigase生物素化标

瑾萱生物自主研发的Avi标签蛋白生物素标记试剂盒(BirA法)(Biotin Labeling Kit for Avi-tag Protein with BirA)是一种通过生物素连接酶(BirA)对Avi标签融合蛋白或多肽快捷、***地进行生物素标记的试剂盒。生物素标记的蛋白可使用基于Streptavidin或Avidin方法进行纯化或检测，例如使用Streptavidin磁珠对生物素标记蛋白进行纯化，或用HRP等标记的Streptavidin对生物素标记蛋白进行检测。本试剂盒中的生物素连接酶(Biotin-protein ligase, BirA)来源于E.coli，由瑾萱生物自主研发的PerfectProtein™技术平台表达、纯化获得的重组蛋白，纯度高，活性强，没有额外的标签，不影响生物素标记蛋白的后续检测和纯化。BirA可在ATP存在的条件下，***活化生物素(D-Biotin)形成生物素酰-5’腺苷酸，并特异性地将生物素连接到Avi标签的赖氨酸残基上，从而对目的蛋白进行快捷、***的生物素标记。

Avi标签是由15个氨基酸(GLNDIFEAQKIEWHE)组成的短肽标签，在ATP和生物素存在的条件下，BirA在Avi标签的赖氨酸残基上连接一个生物素，从而实现目的蛋白的生物素标记[1]。生物素连接酶BirA特异性的生物素标记Avi标签有多方面的优点。Avi标签小且对融合蛋白的影响非常小，只针对Avi标签上的Lys残基进行特定位置的生物素标记，生物素标记***，可重复性好；体内或体外均可进行标记，标记后的蛋白与链霉亲和素(Streptavidin)的亲和力高，从而使Avi-tag技术可以应用于目的蛋白的固定吸附、纯化和检测等；相比于传统生物素化学标记的非特异性位点的标记，BirA催化的反应条件更温和、更简单，对被标记蛋白活力影响小，酶活***，标记特异性强。

生物素(Biotin)与亲和素(Avidin)或链霉亲和素(Streptavidin)之间的非共价相互作用是已知的几乎是的蛋白-配体的相互作用。Avidin或Streptavidin是一种4聚体蛋白，可以同时高度特异性地结合4个生物素分子，是一种天然存在的生物分子相互作用体系。生物素与Avidin或Streptavidin的结合系统，被称为生物素-亲和素或生物素-链霉亲和素系统，该系统是一种具有高度亲和力、高灵敏度、特异性强和稳定性好等优点的信号放大标记技术，已广泛应用于多种检测系统。